Руководство по военной микробиологии

УДК [578+579+612.017](075.8) ББК 52.6+52.54я73

Б82

Автор: Борисов Леонид Борисович — профессор, академик РАЕН, заслуженный деятель науки РФ.

Учебник написан при участии:

Б.Н. Софронова, А.Д. Альтштейна, Н.П. Елинова, В.А. Зуева, А.М. Королюка, Б.Н. Козьмина-Соколова, А.П. Красильникова, В.М. Сафьяновой, Т.Т. Смольской, И.С. Фрейдлин.

Рецензенты:

В.П. Иванов — профессор, заслуженный работник высшей школы, СЗГМУ имени И.И. Мечникова; В.Б. Сбойчаков — профессор, начальник кафедры микробиологии

Военно-медицинской академии имени С.М. Кирова; М.М. Соловьев — профессор кафедры хирургической стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Первого СПбГМУ имени академика И.П. Павлова.

Борисов Л.Б.

Б82 Медицинская микробиология, вирусология, иммунология / Л.Б. Борисов. — 5-е изд., испр. — М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2016. — 792 с.: ил.

ISBN 978-5-8948-1969-3

В соответствии с учебной программой учебник состоит из четырех частей. Часть первая, «Общая медицинская микробиология», содержит сведения об истории микробиологии, вирусологии и иммунологии, о систематике микроорганизмов, морфологии и ультраструктуре, физиологии и биохимии, генетике, микроэкологии, включает микробиологические и молекулярно-биологические основы химиотерапии. Часть вторая. «Инфектология», посвящена молекуляр- но-биологическим и микробиологическим аспектам патогенности и вирулентности бактерий, их токсинам, формам и видам инфекции. Часть третья, «Иммунология», содержит современные сведения о центральных и периферических органах иммунной системы, иммуногенезе, иммунопатологических состояниях и прикладной иммунологии. Часть четвертая, «Частная медицинская микробиология», включает четыре главы: «Медицинская бактериология», «Медицинская вирусология», «Медицинская микология» и «Медицинская протозоология». Специальная глава «Основы клинической микробиологии» написана для субординаторов 6-го курса, а глава «Микробиология и иммунология стоматологических заболеваний» — для студентов стоматологических факультетов. В конце каждой главы приводятся вопросы для самоконтроля.

Учебник предназначен для студентов и аспирантов всех факультетов медицинских вузов.

	УДК [578+579+612.017](075.8)
	ББК 52.6+52.54я73
ISBN 978-5-8948-1969-3	© Борисов Л.Б., 2016
	© Оформление ООО «Медицинское
	информационное агентство», 2016
	Все права защищены. Никакая часть дан-
	ной книги не может быть воспроизведена
	в какой-либо форме без письменного раз-
	решения владельцев авторских прав

Оглавление

Предисловие (Л.Б. Борисов) ………………………………………………………..	18
Введение……………………………………………………………………………………	20
Ч а с т ь п е р в а я
ОБЩАЯ МЕДИЦИНСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ ………………………	23
Глава 1. Предмет и задачи микробиологии
в их историческом развитии (Л.Б. Борисов)……………………….	23
1.1. Начальный период развития микробиологии……………………	25
1.2. Развитие микробиологии во второй половине XIX в.
(пастеровский период)…………………………………………………………..	26
1.3. Развитие микробиологии в первой половине XX в…………….	31
1.4. Развитие микробиологии, вирусологии и иммунологии
во второй половине ХХ в. (современный период) …………………..	35
1.5. Развитие микробиологии в России …………………………………..	38
Глава 2. Систематика и номенклатура
микроорганизмов (Л.Б. Борисов)………………………………………	42
Глава 3. Морфология, ультраструктура и химический состав
микроорганизмов (бактерий) (Л.Б. Борисов) ……………………..	46
3.1. Бактерии…………………………………………………………………………	46
3.1.1. Морфология……………………………………………………………..	46
3.1.2. Ультраструктура……………………………………………………….	48
3.2. Спирохеты………………………………………………………………………	58
3.3. Актиномицеты………………………………………………………………..	59
3.4. Риккетсии ………………………………………………………………………	60
3.5. Хламидии ……………………………………………………………………….	60
3.6. Микоплазмы и уреаплазмы……………………………………………..	61

4	Оглавление
Глава 4. Физиология и биохимия
микроорганизмов (бактерий) (Л.Б. Борисов)……………………..	63
4.1. Метаболизм …………………………………………………………………….	63
4.1.1. Исходные соединения для анаболических
и катаболических реакций. Питание…………………………………	63
4.1.2. Факторы роста …………………………………………………………	65
4.1.3. Транспорт питательных веществ……………………………….	66
4.1.4. Ферменты ………………………………………………………………..	67
4.1.5. Пластический (конструктивный) метаболизм …………..	68
4.1.6. Ионный обмен …………………………………………………………	70
4.1.7. Энергетический метаболизм
(биологическое окисление) ……………………………………………….	71
4.1.7.1. Получение энергии путем субстратного
фосфорилирования. Брожение …………………………………….	72
4.1.7.2. Получение энергии путем окислительного
фосфорилирования ……………………………………………………..	75
4.2. Пигменты……………………………………………………………………….	76
4.3. Светящиеся и ароматообразующие микроорганизмы……….	76
4.4. Рост и размножение бактерий ………………………………………….	77
4.4.1. Размножение бактерий на жидких и плотных
питательных средах. Фазы развития бактериальной
популяции ……………………………………………………………………….	78
4.4.2. Принципы культивирования и идентификации
бактерий ………………………………………………………………………….	80
4.5. Микробные сообщества…………………………………………………..	84
Глава 5. Общая вирусология (Л.Б. Борисов) …………………………………..	87
5.1. Общая характеристика вирусов………………………………………..	87
5.1.1. Морфология и структура вирионов……………………………	88
5.1.2. Химический состав вирионов ………………………………….	90
5.2. Взаимодействие вируса с клеткой хозяина ……………………….	94
5.2.1. Продуктивная инфекция. Репродукция вирусов ……….	94
5.2.2. Интегративная инфекция. Интеграция (встраивание)
вирусной нуклеиновой кислоты в клеточный геном…………	100
5.2.3. Дефектные вирусы………………………………………………….	101
5.3. Культивирование и индикация вирусов………………………….	102
5.4. Вирусы бактерий (бактериофаги, или фаги)……………………	103
5.5. Прионы…………………………………………………………………………	111

Оглавление	5
Глава 6. Генетика микроорганизмов (Л.Б. Борисов)………………………	113
6.1. Организация генетического материала у бактерий.
Генотип, фенотип бактерий и генофонд их популяций…………	114
6.2. Внехромосомные факторы наследственности…………………	115
6.2.1. Плазмиды ………………………………………………………………	116
6.2.2. Транспозоны………………………………………………………….	119
6.2.3. Is-последовательности ……………………………………………	120
6.2.4. Умеренные и дефектные фаги…………………………………	120
6.3. Модификации……………………………………………………………….	121
6.4. Мутации ……………………………………………………………………….	122
6.5. R–S-диссоциации …………………………………………………………	125
6.6. Мутагены………………………………………………………………………	126
6.7. Репарации……………………………………………………………………..	127
6.8. Генетические рекомбинации………………………………………….	129
6.8.1. Трансформация ……………………………………………………..	131
6.8.2. Трансдукция ………………………………………………………….	132
6.8.3. Конъюгация …………………………………………………………..	134
6.9. Основы популяционной генетики ………………………………….	137
6.10. Генетика вирусов………………………………………………………….	139
6.11. Практическое значение учения о генетике
микроорганизмов и генная инженерия в медицинской
микробиологии …………………………………………………………………..	141
Глава 7. Основы общей и медицинской микробной экологии
(микроэкология) (А.М. Королюк, А.П. Красильников) ……….	144
7.1. Введение в микроэкологию…………………………………………….	144
7.2. Микробы и биосфера Земли …………………………………………..	149
7.2.1. Роль микробов в круговороте азота и углерода…………	150
7.2.2. Роль микробов в круговороте других биогенных
элементов……………………………………………………………………….	153
7.3. Основы санитарной микробиологии ………………………………	155
7.3.1. Микрофлора почвы…………………………………………………	155
7.3.2. Микрофлора воды ………………………………………………….	157
7.3.3. Микрофлора воздуха………………………………………………	159
7.3.4. Микрофлора других объектов …………………………………	161
7.4. Медицинская микроэкология ………………………………………..	161
7.4.1. Естественная микрофлора тела человека …………………	162
7.4.2. Развитие естественной микрофлоры
у новорожденных и детей раннего возраста ……………………..	162

6	Оглавление
7.4.3. Характеристика основных микробиоценозов
организма человека…………………………………………………………	164
7.4.4. Эубиоз и дисбиоз…………………………………………………….	171
7.4.5. Лабораторная диагностика, коррекция
и профилактика дисбиоза……………………………………………….	173
7.5. Влияние факторов среды на микроорганизмы………………..	175
7.5.1. Действие физических факторов……………………………….	176
7.5.2. Действие химических факторов ………………………………	178
7.6. Цели и способы антимикробных мероприятий……………….	178
7.6.1. Стерилизация и пастеризация…………………………………	179
7.6.2. Дезинфекция………………………………………………………….	182
7.6.3. Антисептика…………………………………………………………..	184
7.6.4. Асептика ………………………………………………………………..	184
Глава 8. Микробиологические и молекулярно-биологические
основы химиотерапии инфекционных болезней
(Л.Б. Борисов) ………………………………………………………………	186
8.1. Важнейшие группы химиотерапевтических препаратов
и механизмы их антимикробного действия…………………………..	187
8.2. Антибиотики ………………………………………………………………..	190
8.2.1. Общая характеристика……………………………………………	190
8.2.2. Важнейшие группы антибиотиков и механизмы
их противомикробного действия …………………………………….	193
8.2.2.1. Антибиотки, подавляющие синтез
бактериальной клеточной стенки ……………………………….	193
8.2.2.2. Антибиотики, нарушающие функции
цитоплазматической мембраны (ЦМ)
микроорганизмов ………………………………………………………	197
8.2.2.3. Атибиотики, ингибирующие синтез белка
на рибосомах бактериальных клеток…………………………..	198
8.2.2.4. Антибиотики, ингибирующие
РНК-полимеразу………………………………………………………..	202
8.2.2.5. Антибиотики, ингибирующие репликацию
и транскрипцию (противоопухолевые препараты) ………	203
8.3. Лекарственная устойчивость бактерий и пути
ее преодоления ……………………………………………………………………	204
8.4. Химиотерапия вирусных инфекций……………………………….	208

Оглавление	7
Часть вторая
ИНФЕКТОЛОГИЯ (УЧЕНИЕ ОБ ИНФЕКЦИИ)
(Л.Б. Борисов) …………………………………………………………………………..	211
Глава 9. Общая характеристика инфекции …………………………………	211
9.1. Определение, условия возникновения инфекции
и пути передачи возбудителя ……………………………………………….	211
9.2. Формы инфекции и их характеристика ………………………….	212
9.3. Периоды инфекционной болезни …………………………………..	215
Глава 10. Возбудители инфекций и их свойства …………………………..	218
10.1. Патогенность, вирулентность и токсичность…………………	218
10.1.1. Факторы вирулентности бактерий
и их характеристика………………………………………………………..	219
10.1.2. Характеристика бактериальных токсинов ……………..	222
10.2. Генетический контроль вирулентности
и токсинообразования…………………………………………………………	227
10.3. Инфекционные свойства вирусов
и особенности вирусных инфекций……………………………………..	230
10.4. Эволюция микробного паразитизма
и происхождение патогенных микроорганизмов…………………..	234
Часть третья
ИММУНОЛОГИЯ ………………………………………………………………….	238
Глава 11. Общая характеристика, виды
и формы иммунитета (Б.Н. Софронов) ………………………….	238
Глава 12. Факторы и механизмы врожденного иммунитета
(неспецифическая резистентность) ………………………………	244
12.1. Нормальная микрофлора организма человека
(Л.Б. Борисов) ………………………………………………………………………	244
12.2. Внешние барьеры…………………………………………………………	245
12.2.1. Кожа и слизистые оболочки ………………………………….	245
12.3. Внутренние барьеры…………………………………………………….	246
12.3.1. Клеточные факторы ……………………………………………..	246
12.3.1.1. Фагоцитирующие клетки (И.С. Фрейдлин)……….	246
12.3.1.2. Естественные клетки-киллеры (ЕК)
(Л.Б. Борисов)……………………………………………………………..	251

8	Оглавление
	12.3.2. Гуморальные факторы ………………………………………….	252
	12.3.2.1. Лизоцим………………………………………………………..	252
	12.3.2.2. Система комплемента ……………………………………	252
	12.3.2.3. Белки острой фазы (Б.Н. Софронов) ………………..	255
	12.3.2.4. Цитокины и интерфероны …………………………….	256
	12.3.2.5. Белки теплового шока …………………………………..	265
Глава 13. Органы и клетки иммунной системы ……………………………	267
	13.1. Центральные и периферические органы
	иммунной системы ……………………………………………………………..	269
	13.2. Клетки иммунной системы ………………………………………….	273
	13.2.1. Иммунокомпетентные клетки ………………………………	273
	13.2.2. Антигенпредставляющие клетки (АПК) ……………….	284
	13.2.3. Клетки антиген-неспецифической
	резистентности ………………………………………………………………	287
	13.3. Взаимодействие (кооперация) клеток
	при разных формах иммунного ответа …………………………………	289
Глава 14. Антигены (Л.Б. Борисов, Б.Н. Софронов)……………………….	294
	14.1. Основные свойства и строение антигенов ……………………..	294
	14.2. Антигены организма человека ……………………………………..	300
	14.3. Антигены микроорганизмов ………………………………………..	305
Глава 15. Антитела (иммуноглобулины) и антигенсвязывающие
	рецепторы лимфоцитов (Л.Б. Борисов, Б.Н. Софронов) …..	310
	15.1. Антитела (иммуноглобулины)………………………………………	311
	15.2. Структура иммуноглобулинов ……………………………………..	312
	15.3. Классы и типы иммуноглобулинов……………………………….	313
	15.3.1. Свойства иммуноглобулинов…………………………………	314
	15.4. Антиглобулиновые антитела ………………………………………..	318
	15.5. Антиидиотиповые антитела …………………………………………	319
	15.6. Рецепторы антиген-реактивных лимфоцитов ……………….	320
	15.6.1. Антигенраспознающие рецепторы В-лимфоцитов …	320
	15.6.2. Рецепторы Т-лимфоцитов……………………………………..	321
	15.7. Генетический контроль иммунного ответа ……………………	321
Глава 16. Возрастные особенности иммунитета (А.М. Королюк) ……	325
	16.1. Внутриутробный период ………………………………………………	325
	16.2. Иммунная система новорожденных,
	детей и подростков………………………………………………………………	328

Оглавление	9
16.3. Иммунные факторы грудного женского молока…………….	334
16.4. Иммунная система при старении………………………………….	337
Глава 17. Механизмы специфического иммунитета
в противоинфекционной защите организма …………………..	339
17.1. Особенности иммунитета
при бактериальных инфекциях (Л.Б. Борисов)………………………	340
17.2. Особенности иммунитета при вирусных инфекциях …….	341
17.3. Особенности иммунитета
при грибковых инфекциях (Н.П. Елинов)………………………………	343
17.4. Особенности иммунитета
при протозойных инвазиях (М.В. Сафьянова) ……………………….	344
Глава 18. Иммунопатология (Б.Н. Софронов) ………………………………	346
18.1. Иммунодефицитные состояния……………………………………	346
18.2. Реакции гиперчувствительности ………………………………….	349
18.3. Аутоиммунные процессы……………………………………………..	355
Глава 19. Прикладная иммунология
(Б.Н. Софронов, И.С. Фрейдлин, Л.Б. Борисов) ……………….	358
19.1. Иммунологическое обследование человека …………………..	359
19.1.1. Оценка иммунного статуса ……………………………………	359
19.1.2. Выявление антигенов ……………………………………………	361
19.1.3. Специфические реакции организма на антиген ……..	362
19.2. Серологические реакции ……………………………………………..	364
19.2.1. Реакции, протекающие с укрупнением антигена……	365
19.2.2. Реакции, протекающие с нейтрализацией
антигена…………………………………………………………………………	369
19.2.3. Реакции, протекающие с участием комплемента……	371
19.2.4. Реакции, протекающие с участием фагоцитов ……….	373
19.2.5. Реакции, протекающие с участием меченых
антигенов или антител ……………………………………………………	374
19.3. Вакцины. Иммунные сыворотки. Иммуноглобулины …..	376
19.3.1. Вакцины……………………………………………………………….	376
19.3.2. Иммунные сыворотки и иммуноглобулины ………….	381
19.3.3. Получение моноклональных антител
(гибридомная технология) ………………………………………………	384

10	Оглавление
Часть четвертая
ЧАСТНАЯ МЕДИЦИНСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ …………………	388
Глава 20. Медицинская бактериология (Л.Б. Борисов)………………….	389
20.1. Кокки ………………………………………………………………………….	389
20.1.1. Грамположительные кокки……………………………………	389
20.1.1.1. Стафилококки ……………………………………………….	390
20.1.1.2. Стрептококки………………………………………………..	396
20.1.2. Грамотрицательные кокки…………………………………….	407
20.1.2.1. Менингококки ………………………………………………	407
20.1.2.2. Гонококки……………………………………………………..	410
20.2. Факультативно-анаэробные грамотрицательные
палочки ………………………………………………………………………………	414
20.2.1. Семейство энтеробактерий (Enterobacteriaceae) ……….	414
20.2.1.1. Эшерихии ……………………………………………………..	418
20.2.1.2. Шигеллы ………………………………………………………	423
20.2.1.3. Сальмонеллы…………………………………………………	427
20.2.1.3.1. Сальмонеллы — возбудители
брюшного тифа и паратифов ………………………………….	429
20.2.1.3.2. Сальмонеллы — возбудители
гастроэнтероколитов……………………………………………..	431
20.2.1.3.3. Сальмонеллы — возбудители
внутрибольничных инфекций……………………………….	433
20.2.1.4. Клебсиеллы …………………………………………………..	435
20.2.1.5. Протеи…………………………………………………………..	437
20.2.1.6. Иерсинии………………………………………………………	439
20.2.1.6.1. Иерсинии чумы………………………………………	440
20.2.1.6.2. Иерсинии энтероколита………………………….	442
20.2.1.6.3. Иерсинии псевдотуберкулеза ………………….	444
20.2.2. Возбудители пищевых отравлений микробной
природы …………………………………………………………………………	445
20.2.2.1. Возбудители пищевых токсикоинфекций……….	446
20.2.2.2. Возбудители пищевых интоксикаций…………….	446
20.3. Семейство вибрионов …………………………………………………..	448
20.3.1. Холерный вибрион………………………………………………..	448
20.4. Аэробные, микроаэрофильные, подвижные,
спирально изогнутые грамотрицательные бактерии …………….	450
20.4.1. Кампилобактер …………………………………………………….	450
20.4.2. Хеликобактер……………………………………………………….	453

ПРОТИВОЭПИДЕМИЧЕСКАЯ ЗАЩИТА ВОЙСК И ПРОБЛЕМЫ ВОЕННОЙ ЭПИДЕМИОЛОГИИ заслуженный деятель науки РФ член-корреспондент РАМН профессор Ю. В. Лобзин Военно-медицинская академия им. С. М. Кирова

Военная эпидемиология § раздел § § военной медицины и одна из важнейших ее отраслей, изучающая вопросы теории и практики противоэпидемической защиты войск выявляет и изучает закономерности возникновения и распространения инфекционных заболеваний среди личного состава в мирное и военное время и разрабатывает мероприятия по их профилактике и ликвидации являясь одновременно разделом общей эпидемиологии, использует ее методы и научные достижения, применяя их к специальным условиям жизни и деятельности личного состава Вооруженных Сил

Военные эпидемиологи России – творцы теории эпидемического процесса Громашевский Павловский Заболотный Рогозин Лев Васильевич Евгений Никанорович Даниил Кириллович Исаак Иосифович Болдырев Беляков Воробьев Бургасов Тихон Ефимович Виталий Дмитриевич Анатолий Андреевич Петр Николаевич

Военные эпидемиологи России – практики, ученые, педагоги Окуневский Берман Елкин Знаменский Яков Леонтьевич Виктор Михайлович Иванович Георгий Андреевич Гапочко Яфаев Носков Сироко Константин Георгиевич Рауэль Хасаньянович Фридрих Савельевич Арон Львович

Инфекционные болезни: (по данным ВОЗ) Ежегодно 2 млрд. людей болеют инфекционными заболеваниями, из которых 17 млн. умирают Ежедневно в мире 50 тыс. смертей обусловлены инфекционными болезнями Инфекции — ведущая причина смертности и первая причина преждевременной смертности Около 50% населения планеты проживает в условиях постоянной угрозы эндемических инфекций

Инфекции и войны Погибли за последние 50 лет в военных конфликтах 23 млн. Умерли в мире от трех инфекций: — Малярия — Туберкулез — ВИЧ/СПИД 160 млн. В период некоторых локальных войн потери от инфекционных болезней существенно превышают боевые

Структура санитарных потерь в некоторых войнах, боевых действиях и военных конфликтах Боевые Небоевые Отношение Войны, боевые действия и военные санитарные «боевые / конфликты потери, % Гражданская война (май 1918 г. – октябрь 1922 г. ) Сражение у р. Халхин-Гол (июнь – сентябрь 1939 г. ) Советско-финляндская война (ноябрь 1939 г. – март 1940 г. ) Великая Отечественная война (июнь 1941 г. – май 1945 г. ; 9 августа – 2 сентября 1945 г. ) Локальная война в Афганистане (декабрь 1979 г. – февраль 1989 г. ) Осетино-ингушский конфликт (октябрь 1992 г. – декабрь 1994 г. ) Вооруженный конфликт в Чечне (декабрь 1994 г. – ноябрь 1996 г. ) потери, % небоевые» 7, 6 87, 5 1 : 11, 4 60, 7 8, 7 6, 8 : 1 50, 5 20, 4 2, 4 : 1 46, 3 23, 6 1, 9 : 1 11, 2 86, 2 1 : 7, 8 62, 2 37, 8 1, 6 : 1 52, 7 47, 3 1, 1 : 1

Примеры влияния эпидемий на ход военных кампаний Афганистан • • • Гибель от инфекционных болезней (брюшной тиф, вирусный гепатит, малярия) в начале ХХ века 10 тысячного Британского экспедиционного корпуса (Северный Афганистан) Практически все военнослужащие 100 тысячного контингента Советских войск переболели инфекциями (1979 -1989) Вооруженный контингент США в настоящее время страдает от «клещевых» , в частности арбовирусных инфекций «Под особым благословением неба будет находиться каждый, возвратившийся из Афганистана живым, здоровым и с головой на плечах» Дж. Гордон, 1913

Структура санитарных потерь от инфекционных болезней Советской Армии в Афганистане (1980 -1988 гг. ) Показатель годы 1980 Доля инфекционных 53, 3 болезней в структуре общей заболеваемости, % 1981 1982 1983 1984 1985 1986 1987 1988 68, 4 67, 6 67, 8 Нозологические формы Острые вирусные гепатиты Тифо-паратифозные заболевания Шигеллезы и др. ОКИ Амебиаз Грипп и другие ОРЗ Ангины Малярия Другие инфекционные и 62, 9 68, 7 68, 0 63, 0 61, 6 Максимальная доля в структуре инфекционной заболеваемости 50, 5% 18, 5% 21, 1% 50, 5% 30, 6% 6, 1% 6, 6% 10, 7%

Особенности структуры, определявшие трудности диагностики и лечения • Микст-инфекции (5 -10%) – Вирусный гепатит + амебиаз – Вирусный гепатит + брюшной тиф – Брюшной тиф + малярия + вирусный гепатит • Комбинированные поражения – Инфекция + огнестрельные ранения – Инфекция + минно-взрывная травма 10

Принципы противоэпидемической защиты войск (Караффа-Корбут К. В. , 1916) Ш противоэпидемические мероприятия должны одновременно проводиться как в войсках, так и среди населения, а «воинские потоки должны проходить через эпидемиологические фильтры и обеззараживаться, благодаря чему инфекции не будут проникать из внутренних районов в действующую армию» Ш действующей армии необходимо создание «института в военных эпидемиологов» Ш лечение инфекционных больных должно производиться как можно ближе к действующей армии, чтобы предотвратить вынос «заразы» в тыл страны

Система противоэпидемической защиты войск Главный государственный санитарный врач РФ ГГСВ МО РФ — зам. ГГСВ РФ Отдел (ГСЭН) ГВМУ МО РФ Нач-к — зам. ГГСВ МО РФ Главный центр ГСЭН МО РФ Начальник — зам. ГГСВ МО РФ, ГГСВ района ответственности ЦГСЭН ВВС Нач. — ГГСВ района ответств. ГГСВ ВВС ЦГСЭН РВСН Нач. — ГГСВ района ответств. ГГСВ РВСН ЦГСЭН ВДВ Нач. — ГГСВ района ответств. ГГСВ ВДВ ЦГСЭН ВМФ Нач. — ГГСВ района ответств. ГГСВ ВМФ Центры ГСЭН флотов Нач. — ГГСВ районов ответств. Главные ГСВ флотов Центры ГСЭН военных округов Нач. — ГГСВ районов ответств. Главные ГСВ военных округов Центры ГСЭН территорий (зон) Нач. — ГГСВ районов ответств. Главные ГСВ территорий (зон)

Иммунопрофилактика в ВС РФ • создана нормативно-правовая база иммунопрофилактики инфекционных болезней среди личного состава ВС РФ • теоретически и экспериментально обоснована возможность одновременной иммунизации в отношении 5 -15 и более инфекций (поражений токсинами); созданы многокомпонентные препараты и схемы комплексной (ассоциированной) иммунизации • улучшилось качество иммунобиологических препаратов (GMP-технологии), возросли требования к условиям их хранения и транспортировки (холодовая цепь), резко снизилась частота поствакцинальных реакций и осложнений

Календарь профилактических прививок личному составу ВС России и США на мирное время * для военнослужащих по призыву, дислоцированных в природных очагах этих инфекций ** обязательная ревакцинация для курсантов первых курсов ВВУЗов

Календарь прививок по эпидемическим показаниям личному составу ВС России и США на мирное время б) Военнослужащие, направляемые в эндемичные Наименование болезни Россия США Сибирская язва + По схеме (6 доз) Холера + Двукратно Гепатит А + Двукратно Гепатит В + Трехкратно Брюшной тиф + Одно-двукратно Желтая лихорадка + Однократно Чума + Трехкратно Менингококковая инфекция + Однократно Бешенство + Трехкратно Полиомиелит Однократно Японский энцефалит Трехкратно Клещевой энцефалит + Туляремия + Пневмония + Грипп + Ку-лихорадка + Лептоспироз + Бруцеллез + —

Распространение наиболее актуальных инфекционных болезней Грипп-ОРЗ, МИ, ВГ Холера, грипп, сыпной тиф, КЭ, ЖЛ Грипп-ОРЗ, ВГ Холера, чума, ЖЛ, сыпной тиф Чума, холера, МИ, ЖЛ, ВГ, сыпной тиф Грипп-ОРЗ, ВГ ВГ – вирусные гепатиты, ЖЛ – желтая лихорадка, КЭ – клещевой энцефалит МИ – менингококковая инфекция Во всех странах мира регистрируются инфекции, имеющие глобальное распространение: грипп-ОРЗ, вирусные гепатиты, брюшной тиф, менингококковая инфекция, сыпной тиф, дифтерия

Принятые в Вооруженных Силах РФ схемы комплексной и ассоциированной иммунизации 1. БАЗОВАЯ ОВ+ЧВ+Полианатоксин 2. РАСШИРЕННАЯ (ОВ+ЧВ)+(БТВ+ Полианатоксин+СВ) 3. УНИВЕРСАЛЬНАЯ (БТВ+ОВ)+(МВ+ДА)+ Гр. В или ГА 6. СРЕДНЕАЗИАТСКАЯ (ОВ+ЧВ)+(ХВ+БТВ)+ГА 4. ВМФ (ОВ+ЧВ)+(ХВ+ЖЛВ)+ Полианатоксин 5. РАСШИРЕННАЯ ВМФ (ОВ+ЧВ+ВЭЛ)+(ХВ+ЖЛВ+ +Полианатоксин) 7. ДАЛЬНЕВОСТОЧНАЯ (ОВ+ЧВ)+ +Полианатоксин+КЭ БТВ — вакцина брюшнотифозная, ВЭЛ – вакцина венесуэльского энцефаломиелита лошадей, ГА — вакцина гепатита А, Гр. В — вакцина гриппозная, ДА – дифтерийный анатоксин, ЖЛВ – вакцина желтой лихорадки, КЭ – вакцина клещевого энцефалита, МВ – менингококковая вакцина, ОВ — вакцина оспенная, СВ – вакцина сыпнотифозная, ХВ — вакцина холерная, ЧВ — вакцина чумная

Безыгольный инъектор БИ-30 М Предназначение: внутрикожное, подкожное и внутримышечное введения лекарственных средств в объеме 0, 1 … 1, 0 мл Производительность – до 700 инъекций/час Предотвращает передачу возбудителей инфекций между пациентами в ходе массовых инъекций Принят на снабжение в 1999 г. Основные технические данные и характеристики Доза разовой инъекции, мл Допустимое отклонение дозы от установленного значения, % Характер инъекции Вместимость флакона для препарата, мл от 0, 1 до 1, 0 10 внутрикожно, подкожно, внутримышеч но от 10 до 100 Масса исполнительной части инъектора, кг, не более 1, 5 Масса инъектора в укладке, кг, не более 12 Размеры футляра, мм 450± 5 х325± 5 х135± 5 Взведение инъектора ножное Средний срок службы инъектора до списания, лет, не менее Средняя наработка на отказ, срабатываний, не менее 5 20000

Технические средства противоэпидемической защиты войск в полевых условиях Приняты на снабжение • • • Хемилюминесцентный анализатор качества воды Безыгольный инъектор БИ-30 М Средство экспресс-контроля качества дезинфекции Дезинфекционно-душевой комплекс Дезинфекционный автомобиль медицинской службы • Комплект отбора проб микробиологический • Комплект твердофазного точечного ИФА • Микроскоп люминесцентный широкопольный Находятся в разработке: • Микроскоп инвертированный полевой • Устройство очистки и обеззараживания воды одноразовое • Комплект санитарный войсковой • Лаборатория санитарно-эпидемиологическая подвижная Планируются к разработке: • Подвижный медико-профилактический комплекс • Универсальный ранцевый дезинфекционный прибор • Дезинфекционная установка подвижная войсковая

Многолетняя динамика заболеваемости корью военнослужащих, проходящих службу по призыву (1998 -2005 годы, ‰) 2005

Эпидемиологическая эффективность вакцины «Пневмо 23» в профилактике внебольничных пневмоний в учебных центрах ВС РФ за пятимесячный поствакцинальный период наблюдения (декабрь 2002 г. — апрель 2003 г. ) СКВО Лен. ВО КЭ, % р Привитые 2403 21, 64 2, 58 61, 24 < 0, 001 2797 55, 77 Привитые 1911 70, 51 2, 32 56, 90 < 0, 001 167 173, 65 Привитые 1180 115, 25 2, 0 50, 0 < 0, 001 604 230, 1 Привитые 1670 43, 71 2, 12 52, 83 < 0, 001 Непривитые Сиб. ВО ИЭ Непривитые ПУр. ВО I, ‰ Непривитые ДВО Выборочные группы и их численность Непривитые Военный округ 2814 92, 43 Привитые 985 37, 56 3, 88 74, 23 < 0, 001 Непривитые 645 145, 74

Многолетняя динамика заболеваемости ВИЧ-инфекцией в РФ и ВС РФ, ‰

ВИЧ-инфекция – угроза обороноспособности страны К 2010 году СПИД может стать одним из основных факторов, непосредственно влияющих на обеспечение обороноспособности РФ: • 75% больных – мужчины • 84% — в возрасте 15 -30 лет • за последние 10 лет российская армия недосчиталась в своих рядах примерно трех сухопутных дивизий и еще 10 тыс. подростков призывного возраста не пошли в армию, так как инфицированы ВИЧ (Онищенко Г. Г. , 2003).

Важнейшие итоги развития военной эпидемиологии §Обоснована теория саморегуляции паразитарных систем — предмет открытия «Явление внутренней регуляции эпидемического процесса»

Важнейшие итоги развития военной эпидемиологии v Разработаны и нашли применение в практике основные разделы эпидемиологической диагностики, позволяющие специалисту и исследователю: Ø Ø Ø грамотно проводить эпидемиологический анализ инфекционной и неинфекционной заболеваемости, осуществлять эпидемиологическое прогнозирование, обосновывать потенциально эффективные санитарно-противоэпидемические (профилактические) и лечебные мероприятия

Важнейшие итоги развития военной эпидемиологии • Разработаны теоретические и прикладные аспекты учения об эпидемическом процессе актуальных для ВС инфекций (грипп и другие ОРЗ, ангины, пневмонии, корь, менингококковая инфекция, вирусные гепатиты, шигеллезы и др. ) и инвазий • Внедрены в практику передовые технологии диагностики, профилактики и лечения актуальных для ВС инфекций (вирусных гепатитов и острых кишечных инфекций, внебольничных пневмоний, инфекций, передающихся преимущественно половым путем)

Важнейшие итоги развития военной эпидемиологии • Разработаны мероприятия по защите личного состава в случае применения биологического оружия эвентуальным противником, а также при использовании биологических поражающих агентов при совершении террористических актов • Показаны возможности повышения эффективности вакцинопрофилактики и экстренной химиопрофилактики актуальных для войск инфекций (профилактика внебольничных пневмоний и острых респираторных инфекций в организованных коллективах взрослых)

Важнейшие итоги развития военной эпидемиологии • Обоснованы предложения по совершенствованию структуры санитарно-эпидемиологических учреждений МО РФ, в том числе для условий чрезвычайных ситуаций • Проведен системный анализ и выявлены основные исторические вехи развития военной профилактической медицины, показано ее значение для военной медицины и медицинской науки в целом • Научно-методическая работа • Съезды военных профилактиков и научно-практические конференции по эпидемиологии, позволяют специалистам обмениваться научными знаниями и практическим опытом • Учебные пособия и инструктивно-методические труды, разработанные ведущими специалистами ВВУЗов и НИИ МО

Санитарно-эпидемиологическое отделение 220 медицинского отряда специального назначения МО РФ Старший офицер (по медицинскому снабжению в ЧС) Начальник – заместитель начальника 220 МОСН Старший офицер (по материальнотехническому обеспечению в ЧС) Инженер (по обеспечению связи в ЧС) О С Н О В Н Ы Е П О Д Р А З Д Е Л Е Н И Я Санитарноэпидемиологический отдел Отдел индикации и идентификации биологических агентов Токсикологический отдел Радиологический отдел

Российский военнополевой инфекционный госпиталь в Индонезии, январь 2005 г.

Последствия разрушений, вызванных цунами Индонезия, январь 2005 г.

Сотрудники Российской военно-медицинской академии участвуют в программе массовой вакцинации против кори

Сотрудники Военно-медицинской академии участвуют в программе массовой вакцинации против кори

Приоритетные направления обеспечения биологической безопасности: vсовершенствование законодательной базы vреализация экономических механизмов обеспечения биологической безопасности, направленных на поддержание высокого уровня фундаментальной и прикладной науки vохрана территории от заноса инфекций vпредупреждение биотерроризма

Перспективные направления развития государственного санитарноэпидемиологического надзора в ВС РФ • Четкое разграничение функций медицинского контроля войскового звена медицинской службы и государственного санитарноэпидемиологического надзора, осуществляемого санитарноэпидемиологическими учреждениями МО РФ • Улучшение материально-технического обеспечения ЦГСЭН МО РФ, их техническое переоснащение • Внедрение современных форм и методов организации и осуществления госсанэпиднадзора, санитарно-эпидемиологических экспертиз, социально-гигиенического мониторинга за состоянием здоровья военнослужащих и средой обитания • Совершенствование научно-методической базы деятельности ЦГСЭН МО РФ по обеспечению санитарно-эпидемиологического благополучия войск (сил) • Адаптация экономической деятельности ЦГСЭН МО РФ, находящихся на бюджетном финансовом обеспечении, к условиям рыночных отношений в стране

Человечество обречено сосуществовать с микроорганизмами Главная цель профилактиков – защитить людей от болезней и смертей. Существенная роль в этом благородном деле принадлежит военным эпидемиологам.

Важнейшие нормативно-технические документы ВС РФ в области противоэпидемической защиты, изданные в 2002 – 2006 гг. • • • • • Руководство по организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профилактических) и лечебно-эвакуационных мероприятий в войсках (силах) в условиях применения противником биологического оружия Руководство по организации и проведению санитарно-эпидемиологического надзора и медицинского контроля в войсках (силах) на военное время Руководство по военной микробиологии Руководство по устройству и эксплуатации ЛПУ МО РФ. Санитарноэпидемиологические требования. Санитарно-противоэпидемические (профилактические) мероприятия. Часть 1, 2 Наставление по иммунопрофилактике инфекционных болезней в ВС РФ Указания по санитарному надзору за водоснабжением военных городков Указания по санитарному надзору за объектами продовольственной службы воинской части Указания по санитарному надзору за очисткой военных городков Инструкция по экстренной профилактике и этиотропному лечению опасных инфекционных заболеваний в ВС РФ Планирование, организация и оценка результатов испытаний эпидемиологической эффективности профилактических препаратов в ВС РФ Вакцинопрофилактика вирусного гепатита В в ВС РФ. Методические рекомендации ВИЧ-инфекция. Этиология, патогенез, эпидемиология, клиника, диагностика, лечение и профилактика в ВС РФ Методические указания по оперативному эпидемиологическому анализу инфекционной заболеваемости личного состава ВС РФ Методические указания по ретроспективному эпидемиологическому анализу и прогнозированию заболеваемости личного состава ВС РФ Диагностика, лечение и профилактика гельминтозов и заболеваний, вызываемых кишечными простейшими Методические указания по диагностике иерсиниозов Методические указания по диагностике урогенитального микоплазмоза Методические рекомендации по организации работы диагностических лабораторий, использующих метод полимеразной цепной реакции

В. Б. Сбойчаков
Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований : учебник для средних медицинских учебных заведений

УСЛОВНЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

А – аденин

АГ – антиген

АГВ – агар Гевинталя – Ведьминой

АДФ – аденозиндифосфат

АЕ – антитоксическая единица

АМФ – аденозинмонофосфат

АТ – антитело

АТС – антитоксическая сыворотка

АТФаза – аденозинтрифосфатаза

АТФ – аденозинтрифосфат

БГКП – бактерии группы кишечной палочки

БГЛ – большие гранулярные лимфоциты

БКЯ – болезнь Крейтцфельдта – Якоба

БЛА – бета-лактамные антибиотики

БО – биологическое оружие

БОЕ – бляшкообразующая единица

БПА – биологические патогенные агенты

БС – биологические средства

ВГЧ – вирус герпеса человека

ВИД – вторичный иммунодефицит

ВИЧ – вирус иммунодефицита человека

ВОЗ – Всемирная организация здравоохранения

ВПГ – вирусы простого герпеса

ГЗТ – гиперчувствительность замедленного типа

ГНТ – гиперчувствительность немедленного типа

ГХ – газовая хроматография

ГЦ – содержание гуанина и цитозина в ДНК

ДГФК – дигидрофолиевая кислота

ДГПС – дигидроптероатсинтетаза

ДК – дендритные клетки

ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота

ДСН – додецилсульфат натрия

ДТ – дифтерийный токсин

ЕК – естественные киллеры

ЖКТ – желудочно-кишечный тракт

ЖСА – желточно-солевой агар

ИБ – иммунный блотинг

ИК – иммунные комплексы

ИЛ (Il) – интерлейкин

ИМ – иммунологические методы

ИФА – иммуноферментный анализ

ИЭМ – иммуноэлектронная микроскопия

КВН – среда, содержащая антибиотики – колистин, ванкомицин, нистатин

КК – культура клеток

ККГЛ – конго-крымская геморрагическая лихорадка

КОЕ – колониеобразующие единицы

КонА – конкавалин А

КОС – коагулазоотрицательный стафилококк

КЭ – куриный эмбрион

ЛЖК – летучие жирные кислоты

ЛПС – липополисахарид

ЛПУ – лечебно-профилактические учреждения

МАФАнМ – мезофильные анаэробные и факультативные анаэробные микроорганизмы

МБК – минимальная бактерицидная концентрация

МКАТ – моноклональные антитела

МКТВ – Международный комитет по таксономии вирусов

м. м. – молекулярная масса

МПА – мясо-пептонный агар

МПБ – мясо-пептонный бульон

МПК – минимальная подавляющая концентрация

МФА – метод флюоресцирующих антител

НАД – никотинамидадениндинуклеотид

НАДФ – никотинамидадениндинуклеотид-фосфат

НВЧ – наиболее вероятное число

НОА – неспорообразующие анаэробы

ОВИД – общий вариабельный иммунодефицит

ОВП – окислительно-восстановительный потенциал

ОКБ – общие колиформные бактерии

ОМЧ – общее микробное число

ОСКС – обогащенная среда для контроля стерильности

ОФ – острофазные белки

ПАБК – парааминобензойная кислота

ПАВ – поверхностно-активные вещества

ПВК – пировиноградная кислота

ПИД – первичный иммунодефицит

ПИФ – прямой иммунофлюоресцентный метод

ПСБ – пенициллинсвязывающие белки

ПЦР – полимеразная цепная реакция

РА – реакция агглютинации

РАР – реакция агглютинации с риккетсиями

РГА – реакция гемагглютинации

РГадс – реакция гемадсорбции

РИА – радиоиммунный анализ

РИФ – реакция иммунофлюоресценции (синоним – МФА)

РКА – реакция коагглютинации

РЛА – реакция латекс-агглютинации

РН – реакция нейтрализации

РНГА – реакция непрямой гемагглютинации (синоним – РПГА)

РНК – рибонуклеиновая кислота

РНП – рибонуклеопротеиновый

РП – реакция преципитации

РПГА – реакция пассивной гемагглютинации

РСК – реакция связывания комплемента

РТ – ретикулярное тельце

РТГА – реакция торможения гемагглютинации

РТГадс – реакция торможения гемадсорбции

САА – сывороточный белок амилоида А

САП – сульфаниламидные препараты

СГШШ – синдром Герстмана – Штраусслера – Шейнкера

СИ – специфическая индикация

СКС – среда контроля стерильности

СОЭ – скорость оседания эритроцитов

СПИД – синдром приобретенного иммунодефицита

СПМО – санитарно-показательные микроорганизмы

СРБ – С-реактивный белок

СЭУ – санитарно-эпидемиологические учреждения

Т – тимин

ТКБ – термотолерантные колиформные бактерии

ТКИД – тяжелый комбинированный иммунодефицит

ТКР – Т-клеточный антигенраспознающий рецептор

У – урацил

УФ – ультрафиолет

ФГА – фитогемагглютинин

ФК – фолиевая кислота

ФНО – фактор некроза опухолей

ХАО – хорион-аллантоисная оболочка

ЦНС – центральная нервная система

ЦПД – цитопатическое действие (вируса)

ЦПМ – цитоплазматическая мембрана

ЭТ – элементарное тельце

CD – (cluster differention) кластер дифференциации

CTL – цитотоксические лимфоциты

DCL – (dosis certa letalis) количество микроорганизмов или токсинов, вызывающее гибель 100 % животных

DLM – (dosis letalis minima) минимальное количество микроорганизмов или токсинов, вызывающее гибель 80 % животных

HLA – (human leukocyte antigens) МНС человека

ID – инфицирующая доза

IFN – интерфероны

Ig – иммуноглобулин

LD50 – количество микроорганизмов, вызывающее гибель 50 % животных

MALT – mucosal-associated limphoid tissue – ассоциированная со слизистыми лимфо-идная ткань

МНС – (major histocompatibility complex) главный комплекс гистосовместимости

NCCLS – Национальный комитет по клинико-лабораторным стандартам США

PrP – сиалогликопротеид

RW – реакция Вассермана

ПРЕДИСЛОВИЕ

Прошло менее двух лет с момента выхода в свет первого издания учебника «Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований» для студентов медицинских колледжей. Достаточно большой тираж оказался весьма востребованным читателями.

Столь высокая популярность учебного издания объясняется целым рядом причин.

В последнее время существенно возросла роль этиологической лабораторной диагностики инфекционных заболеваний, что требует изучения современных микробиологических методик. Усиление роли микробиологии в составе комплекса медико-биологических наук подтверждает присуждение в 2008 г. Нобелевской премии в области физиологии и медицины ученым-вирусологам: Харальду цур Хаузену, доказавшему роль папилломавирусов в этиологии рака шейки матки, а также Люку Монтенье и Франсуазе Барре-Синусси, работавшим над изучением вируса иммунодефицита человека (и впервые выделившим его из зараженных клеток).

Важной для нас стала и обеспокоенность вопиющей диспропорцией между количеством медицинских специалистов с высшим и средним образованием, что, в свою очередь, диктует необходимость подготовки к изданию современных учебников для учреждений среднего профессионального образования.

В последние годы оживился интерес к биотехнологическим исследованиям в плане этиологической лабораторной диагностики самых разнообразных заболеваний инфекционной природы. По-прежнему реальной остается и угроза биотерроризма.

По мнению автора, далеко не последнюю роль сыграло широкое использование книги отдельными студентами медицинских вузов, которым просто лень штудировать достаточно сложные учебники по микробиологии для вузов. Однако данная негативная тенденция заставила автора иначе взглянуть на проблему создания любого учебника вообще и, в частности, увидеть необходимость рассмотрения учебника как варианта справочного пособия.

Все это побудило автора актуализировать содержание учебника в соответствии с новейшими достижениями медико-биологической науки XXI в.

В этой связи в состав авторского коллектива были приглашены наиболее компетентные в соответствующих разделах курса специалисты.

Автор с благодарностью принял все замечания, высказанные медицинской общественностью в адрес первого издания учебника.

Книга написана при участии профессоров В. Д. Бадикова, А. В. Москалева, Е. П. Сиволодского, доктора медицинских наук А. М. Иванова, доктора биологических наук А. В. Зачиняевой, доцентов В. А. Андреева, И. И. Волкова, М. Л. Медведева и кандидатa медицинских наук М. М. Карапаца.

Профессор В. Б. Cбойчаков

ВВЕДЕНИЕ

Микробиология – это наука, изучающая мир микроскопических существ. Термин происходит от древнегреческих слов «микрос» – малый, «биос» – живой и «логос» – наука (учение). Это самостоятельная медико-биологическая дисциплина, без глубокого знания которой невозможно изучить другие медицинские дисциплины.

В соответствии с запросами и нуждами практики произошла дифференциация микробиологии на самостоятельные научные разделы и дисциплины. В настоящее время самостоятельное значение имеют общая, техническая, фармацевтическая, сельскохозяйственная, ветеринарная, космическая и, наконец, медицинская микробиология.

Предметом изучения медицинской микробиологии являются свойства патогенных (болезнетворных) и условно-патогенных для человека микроорганизмов c целью разработки методов диагностики вызываемых этими микроорганизмами заболеваний.

Объектом изучения медицинской микробиологии являются патогенные и условно-патогенные для человека микроорганизмы.

Медицинская микробиология изучает следующие типы микроорганизмов: бактерии, вирусы и грибы. В последние годы был открыт новый класс возбудителей инфекционных заболеваний — прионы (белковые частицы, лишенные ДНК или РНК).

Вирусы являются представителями неклеточных форм жизни. Они обладают собственным геномом, не способны размножаться на искусственных питательных средах, но активно размножаются (репродуцируются) в живых клетках человека, животных и растений. Вирусы имеют чрезвычайно малые размеры, их невозможно увидеть в световом микроскопе.

Бактерии гораздо крупнее вирусов. В отличие от вирусов они содержат и ДНК, и РНК. Размножаются бактерии путем бинарного деления. Могут расти на искусственных питательных средах, поскольку имеют собственные энергетические системы. К бактериям также относят риккетсии (мелкие бактерии, не способные к росту на искусственных питательных средах), микоплазмы (бактерии, лишенные клеточной стенки) и хламидии (бактерии, обладающие особенным циклом развития).

Грибы, в отличие от бактерий, являются эукариотами. Они крупнее бактерий, в эволюционном плане очень близки к растениям. Для грибов характерно как бесполое, так и половое размножение.

Основные разделы медицинской микробиологии — медицинская бактериология (изучение этиологии или причины заболеваний, вызываемых бактериями), медицинская вирусология (изучение этиологии заболеваний, вызываемых вирусами) и медицинская микология (изучение этиологии заболеваний, вызываемых грибами). В курс медицинской микробиологии органично вписывается учение об иммунитете (специфической иммунной защите человека от чужеродных микроорганизмов и иных инородных веществ), а также санитарная микробиология – наука о санитарно-показательных микроорганизмах.

РАЗДЕЛ I. ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Глава 1
ИСТОРИЯ РАЗВИТИЯ МИКРОБИОЛОГИИ

История изучения любой научной дисциплины дает возможность проследить процессы ее возникновения и развития, понять преемственность идей, уровень современного состояния науки и горизонты дальнейшего прогресса. В развитии микробиологии четко прослеживаются три этапа ее становления как науки.

Первый этап – описательный. Начало этого этапа связывают с научной деятельностью Энтони ван Левенгука. Этот менеджер по продажам тканей имел довольно оригинальное хобби – шлифовать линзы и рассматривать при большом увеличении самые разнообразные биологические субстраты. В 1675 г. он сообщил в Лондонское королевское общество, что в дождевой воде ему удалось обнаружить «живых зверьков» (viva animalcule). Свои наблюдения опубликовал в монографии «Тайны природы, открытые Левенгуком», где детально описал и обрисовал открытые им микроорганизмы. Таким образом, Левенгука следует считать отцом микрографии — описательной микробиологии.

Энтони ван Левенгук

Справедливости ради следует отметить, что задолго до открытия Левенгука многие ученые высказывали гипотезы о материальной причине возникновения инфекционных болезней. Еще Тит Лукреций Кар предполагал, что инфекционные болезни вызываются определенными семенами. Аналогичные взгляды проповедовал и известный врач Средневековья Джироламо Фракасторо. Но ни у кого из них не было научных доказательств.

Второй этап – физиологический.

Его начало связывают с именем французского химика Луи Пастера. Именно он впервые выяснил роль микроорганизмов в природе и жизни человечества. В 1875 г. Пастер показал, что процессы брожения и гниения обусловлены жизнедеятельностью микроорганизмов, а не действием химических веществ. Заслугой Пастера следует также считать доказательства анаэробного (без доступа воздуха) существования микроорганизмов.

Луи Пастер

Ранее в среде ученых бытовало мнение о возможности самопроизвольного зарождения микроорганизмов. Пастер с помощью довольно оригинальных опытов опроверг это утверждение – впитательныхсредах, простерилизованных при высокой температуре и соответствующем давлении пара, микроорганизмы никогда не обнаруживались. Однако, когда среды были недостаточно простерилизованы и в сосуды имелся доступ воздуха, содержащего микроорганизмы, в питательных средах они начинали размножаться. Аналогичным образом Пастер доказал, что порча вина и пива объясняется попаданием в сусло посторонних микроорганизмов или диких дрожжей. Он разработал метод прогревания этих напитков при относительно высокой температуре, что позволило разрушить микроорганизмы порчи и сохранить вкусовые качества напитков. Этот метод получил название пастеризации.

Именно благодаря спонсорской поддержке богатых виноделов и пивоваров Пастер смог продолжать свои дальнейшие научные изыскания.

Далее Пастер пришел к революционному выводу, что болезни человека и животных, как и болезни напитков, вызываются микроорганизмами. Он показал, что каждый микроб вызывает характерное, специфическое для него заболевание. Таким образом Пастером были открыты возбудители куриной холеры, родильной горячки, остеомиелита и газовой гангрены.

В процессе изучения причин инфекционных болезней Пастер сделал еще одно величайшее открытие. Он открыл и разработал метод получения таких микроорганизмов, которые, теряя свою заразность, приобретали способность при введении в организм предохранять его от последующего заражения, т. е. создавать иммунитет. Пастер явился одним из первых биотехнологов и получил вакцины против сибирской язвы и бешенства.

Роберт Кох

Благодарное человечество чтит память Пастера. На средства добровольных пожертвований в 1888 г. в Париже был открыт Пастеровский институт – центр французской бактериологической школы.

Имя Пастера присвоено многим научно-исследовательским институтам в различных странах мира. В России Пастеровский институт открыт в СанктПетербурге.

Прогресс в медицинской микробиологии связан также с именем выдающегося немецкого микробиолога Роберта Коха.

Серией чрезвычайно тщательно подготовленных экспериментов Кох обнаружил и доказал этиологическую роль возбудителей туберкулеза, сибирской язвы и холеры. Он также известен как первооткрыватель плотных питательных сред. Разработанные Кохом методы выделения и культивирования микроорганизмов в лабораторных условиях позволили его ученикам открыть ряд возбудителей инфекционных заболеваний. Не случайно конец ХIX – начало ХХ вв. называют «золотым веком микробиологии». В противовес французской микробиологической школе в Берлине был открыт Институт Коха.

К числу основоположников медицинской микробиологии следует отнести и великого русского «француза» И. И. Мечникова. Этот, по образному выражению Э. Ру, «поэт микробиологии» создал учение о защите организма от чужеродных веществ (инфекционную иммунологию). Кроме того, И. И. Мечников – создатель одного из первых пробиотиков, так называемой «мечниковской простокваши».

Илья Ильич Мечников

Сергей Николаевич Виноградский

Лев Семенович Ценковский

Илье Ильичу поразительно не везло в России. В 1870 г. он не прошел по конкурсу на заведование кафедрой зоологии Медико-хирургической академии. Вакцинируя против сибирской язвы крупное стадо овец одного одесского помещика, И. И. Мечников умудрился погубить все стадо, поэтому в 1882 г. он навсегда покинул Россию и стал работать в институте Пастера в Париже. Тем не менее в 1909 г. И. И. Мечникову была присуждена Нобелевская премия за открытие теории иммунитета. Его учениками были такие всемирно известные микробиологи, как Ж. Борде, А. М. Безредка, Л. А. Тарасевич, П. В. Циклинская, Д. К. Заболотный.

Среди выдающихся деятелей отечественной микробиологии следует назвать имя Л. С. Ценковского, который на основе принципа аттенуации (или ослабления патогенных свойств), разработанного Пастером, получил свой вариант вакцинного штамма возбудителя сибирской язвы, который до сих пор применяется для профилактики этого заболевания у животных. Именно Л. С. Ценковский наметил основные направления изучения микроорганизмов в России. Он способствовал дифференциации микробиологии на ряд самостоятельных дисциплин – общую, медицинскую, ветеринарную, сельскохозяйственную, промышленную и т. д.

Василий Леонидович Омелянский

Даниил Кириллович Заболотный

Выдающуюся роль в становлении и развитии общей микробиологии и микроэкологии сыграл С. Н. Виноградский. Он разработал и внедрил в практику метод избирательных культур, с помощью которого установил значение микроорганизмов в круговороте азота, серы, железа и углерода. С. Н. Виноградский воспитал плеяду выдающихся учеников, среди которых прежде всего следует выделить В. Л. Омелянского, работавшего в области общей и технической микробиологии.

В. Л. Омелянский – автор одного из первых в России руководств «Основы микробиологии». Он исследовал процесс распада клетчатки и экологию почвенных микроорганизмов. При деятельном участии В. Л. Омелянского в 1903 г. было основано «Микробиологическое общество».

Формированию и общему развитию микробиологии в России способствовали также замечательные исследования Н. Ф. Гамалеи. В 1886 г. он организовал первую в России Пастеровскую станцию. Ему принадлежат капитальные труды по изучению бешенства, холеры, туберкулеза. Н. Ф. Гамалея открыл и описал «мечниковский вибрион», названный так в честь именитого друга. Ему также принадлежит идея создания химических вакцин. В честь Н. Ф. Гамалеи был назван Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии Академии медицинских наук.

Выдающимся микробиологом, а впоследствии эпидемиологом был Даниил Кириллович Заболотный, профессор, доктор медицины, академик АН СССР и АН УССР, который создал кафедру микробиологии Военно-медицинской академии. В 1903 г., задолго до открытия возбудителя сифилиса Шаудинном и Гоффманом, он уже демонстрировал бледную трепонему в своих препаратах. В 1909 г. Д. К. Заболотный блестяще защитил докторскую диссертацию «Сифилис, его патогенез и этиология». Научные изыскания выдвинули Д. К. Заболотного в число наиболее авторитетных сифилидологов мира. Впоследствии он занимался проблемами опасных инфекций, впервые доказав природную очаговость чумы и определив роль переносчиков при этой инфекции.

Владимир Дмитриевич Тимаков

Академиком Д. К. Заболотным была создана школа эпидемиологов и микробиологов (Л. В. Громашевский, В. Н. Космодамианский, П. Н. Кашкин).

Третий этап развития микробиологии – современный. Благодаря высокоразвитому техническому оснащению ученые получили возможность детально изучать внутренние структуры микроорганизмов, вмешиваться в процессы их роста и размножения, использовать микроорганизмы в биотехнологических процессах. Выяснилось, что бактерии являются активными продуцентами антибиотиков и других биологически активных соединений – витаминов, аминокислот, стимуляторов роста. В последние годы интенсивно изучаются пробиотики (микроорганизмы, нормализующие микрофлору человека). Все это привело к созданию микробиологической промышленности.

Бурное развитие претерпела иммунология, которая из раздела микробиологии выделилась в самостоятельную медико-биологическую дисциплину. В конце ХХ в. были открыты возбудители новых, ранее неизвестных инфекций – СПИДа, вирусных гепатитов, легионеллеза, болезни Лайма. Наконец, были открыты прионы.

Александр Михайлович Королюк

Владимир Иванович Кочеровец

Создание электронного микроскопа сыграло большую роль в развитии вирусологии и молекулярной биологии. Собственно говоря, современную микробиологию можно назвать молекулярной биологией. На модели бактерий была доказана роль ДНК в передаче наследственной информации. В настоящее время расшифрован геном многих бактерий. Выдающимися учеными-микробиологами, внесшими большой вклад в изучение генетики микроорганизмов, являются В. Д. Тимаков, А. А. Тотолян, А. И. Коротяев и ряд других. Большой вклад в современную микробиологию внесли такие выдающиеся ученые, как О. В. Бухарин, А. А. Воробьев, В. М. Жданов, В. В. Зверев, Э. М. Новгородская, А. А. Смородинцев, Б. Ф. Семенов, А. Н. Маянский, М. П. Чумаков, Л. Я. Эберт и многие другие.

Расшифровка этиологии ранее неизвестной в мире болезни «дальневосточной скарлатиноподобной лихорадки» была проведена в 60-е годы ХХ в. военными микробиологами В. А. Знаменским, Г. П. Сомовым, А. К. Вишняковым и А. М. Королюком.

В. А. Знаменский в опыте самозаражения доказал, что эта болезнь вызывается патогенными микроорганизмами – псевдотуберкулезными иерсиниями.

Александр Михайлович Королюк провел фундаментальные исследования по иммунологии псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза, впервые разработал серодиагностику этих заболеваний и создал технологические регламенты на диагностические препараты, что обеспечило их производственный выпуск и диагностику иерсиниозов в стране. За этот вклад в науку профессор А. М. Королюк был удостоен Государственной премии СССР (1990 г.). А. М. Королюк является основателем новой научной субдисциплины – пробиотической микробиологии.

Евгений Петрович Сиволодский

Обширные пионерские исследования по микробиологии неклостридиальной анаэробной инфекции в России выполнены Владимиром Ивановичем Кочеровцом, который одним из первых в стране внедрил современную методику исследований при этой инфекции. По данной тематике им опубликован ряд монографий, в том числе знаменитая монография «Анаэробные инфекции в хирургии» (1989) совместно с А. П. Колесовым и А. В. Столбовым. Впоследствии В. И. Кочеровец стал видным ученым-микробиологом, одним из основателей новой научной субдисциплины – фармацевтической микробиологии.

Профессор, доктор медицинских наук Евгений Петрович Сиволодский является одним из выдающихся отечественных ученых в области биохимии и систематики условно-патогенных энтеробактерий и псевдомонад, им были открыты их уникальные таксономические маркеры, уточнено систематическое положение псевдомонад, открыт эскулиноположительный биовар синегнойной палочки. На основе новых научных фактов был разработан микрометод биохимической идентификации энтеробактерий, созданы питательные уникальные среды для ускоренного одноэтапного выделения и идентификации возбудителей раневых и госпитальных инфекций.

Современный этап развития микробиологии характеризуется созданием сети научно-исследовательских институтов микробиологического профиля. Основная заслуга отечественных микробиологов заключается в том, что они не только проводят научные изыскания, но и ведут обширную практическую работу, находясь непосредственно в очагах эпидемий. В настоящее время создана крупная научная школа отечественных микробиологов. Представители этой школы не только успешно работают на ниве отечественного здравоохранения, но и, к сожалению, пополняют ряды американских и европейских ученых.

Основной вклад в развитие бактериологических исследований в России внес принц Александр Петрович Ольденбургский, в то время исполнявший обязанности председателя Высочайше утвержденной комиссии о мерах предупреждения и борьбы с чумной заразой. Первоначальные работы по теме шли в Санкт-Петербурге на базе ветеринарной лаборатории Императорского института экспериментальной медицины (ИИЭМ).

Вообще, интерес к направлению появился после знаменитых исследований Роберта Коха, который уже к началу 90-х годов XIX века разработал очень эффективные методы и приемы работы с бактериями в условиях лабораторий. Также актуальности добавили вспышки легочной формы чумы в станице Ветлянской в 1878 году, в таджикском кишлаке Анзоб в 1899 году и в Таловском округе Внутренней Киргизской Орды среди местного населения в 1900 году.

Чумная комиссия, или Комочум, со временем переехала в форт «Александр 1» близ Кронштадта, в котором были гораздо более высокий уровень биологической безопасности.

Полное официальное наименование островной биологической лаборатории звучало так: «Особая лаборатория Императорского института экспериментальной медицины по заготовлению противобубонночумных препаратов в форте «Александр I».

Хотя форт был выведен из штата военного ведомства и из состава оборонительных сооружений, многие сотрудники носили мундиры. Стоит отметить, что даже по современным меркам ученые-микробиологии и инженеры очень неплохо подготовили форт к работе с возбудителями чумы, оспы и холеры: все стоки тщательно обеззараживались кипячением при температуре 120 градусов. Рабочие помещения форта делились на два подразделения: заразное и незаразное. В качестве подопытных животных использовали обезьян, лошадей, кроликов, крыс, морских свинок и даже северных оленей. Но ключевые экспериментальные работы шли с лошадями, которых в конюшнях было до 16 особей. Был даже предусмотрен специальный лифт для животных, на котором их опускали во внутренний двор на выгул. В заразном отделении после смерти подопытных животных в кремационной печи сжигалось всё, от трупов до навоза. Между сушей и фортом курсировал специальный пароход с знаковым именем «Микроб». В общей сложности в течение четверти века работы в лабораториях форта «Александр I» было произведено несколько десятков миллионов флаконов сыворотки и вакцин от стрептококковой инфекции, столбняка, скарлатины, стафилококка, тифа, чумы и холеры.

Ключевой темой исследований в форте стало моделирование механизмов заражения во время вспышек легочной чумы. Однако мировая и отечественная наука в деле моделирования столь сложных и опасных процессов делала первые шаги, поэтому без трагедий не обошлось. В 1904 году скончался Владислав Иванович Турчинович-Выжникевич, заведующий «чумной» лабораторией. В своей книге кандидат биологических наук Супотницкий Михаил Васильевич (заместитель главного редактора журнала «Вестник войск РХБ защиты») приводит выводы специальной комиссии, разбиравшейся в причинах гибели ученого: «Владислав Иванович Турчинович-Выжникевич занимался с 28 по 31 декабря 1903 года опытами по заражению животных распыленными культурами и участвовал приготовлении чумного токсина путем растирания тел чумных микробов, замороженных жидким воздухом». В итоге возбудители чумы проникли в дыхательные пути ученого и вызвали тяжелое течение болезни с летальным исходом. Второй жертвой заражения легочной формой чумы стал доктор Мануил Федорович Шрейбер, промучившийся перед смертью в феврале 1907 года долгих три дня.

Доктор Мануил Федорович Шрейбер, умерший от чумной пневмонии в форте «Александр I»

Крематорий для сжигания чумных трупов. Форт «Александр I»

В 1905 году исследовательскую эстафету аэрозольного инфицирования чумой принял В. И. Гос, который пытался использовать для этого «сухую чумную пыль». Сотрудник «Особой лаборатории» разработал специальный прибор для инфицирования морских свинок специальным мелкодисперсным аэрозолем возбудителя чумы. Всего дело в том, что при нанесении на слизистые оболочки носа возбудителей чумы свинки не заражались, поэтому пришлось уменьшить частицы аэрозоля с бактериями. В приборе доставка возбудителей к глубоким отделам дыхательной системы подопытных животных осуществлялась с помощью мелкодисперсных брызг чумной бульонной культуры. Дисперсность можно было варьировать – для этого Гос предусмотрел регулятор давления воздуха, подаваемого на сопло распылителя. В итоге возбудители чумы попадали непосредственно в альвеолы легких, вызывая сильное воспаление, а затем заражение.

Прибор В. И. Госа для инфицирования лабораторных животных мелкодисперсным аэрозолем возбудителя чумы. Прибор состоял из двух частей: 1) из распылителя «Parolein», употреблявшегося в те годы врачами для ингаляции лекарственных растворов. Госу этот аппарат служил для распыления чумных культур; 2) из особой приемной камеры, приспособленной им к аппарату «Parolein», в которую поступали аэрозольные частицы и фиксировалась голова животного. Приемная камера состояла из стеклянного цилиндра (или простой колбочки Эрленмейера без дна) (I), на одном конце которого надет резиновый колпачок с отверстием, плотно обхватывавшим трубку аппарата «Parolein» (II), из которой поступал в цилиндр аэрозоль («влажная пыль»). Другой конец цилиндра плотно закрыт резиновой пробкой, через которую проходили две стеклянные трубки: одна из них (1), изогнутая, с расширением, в котором помещалась гигроскопическая вата, служила предохранительным клапаном для выхода избытка воздуха, нагнетаемого баллоном (2), другая (3) отводила мельчайшую «влажную пыль» в воронку (4), соединенную с трубкой (3) короткой резиновой трубкой (5). Широкая часть воронки закрывалась резиновым колпачком, плотно обхватывавшим воронку. В середине колпачка сделано отверстие (6), через которое просовывался «конец морды» животного, причем резина плотно обхватывала морду. Голова животного крепко фиксировалась в станке и, кроме того, воронка прикреплялась к голове шнурками (7—7). Чтобы лучше обеспечить изоляцию между воронкой и наружным воздухом, голова животного обкладывалась слоем ваты. Аппарат (I) фиксировался в штативе и вместе с животным обволакивался мокрой марлей, сложенной в несколько слоев. Распыление продолжалось в течение 5 мин. После этого аппарат оставлялся в покое в течение 5 мин, чтобы все капельки успели осесть на стенках аппарата, затем воронка осторожно освобождалась от головы животного, и аппарат поступал в стерилизацию. Голова животного обмывалась раствором сулемы, и животное помещалось в клеткульные пути. Так вызывались заражение и летальный исход. (По книге Супотницкого М. В. Биологическая война. Ведение в эпидемиологию искусственных эпидемических процессов и биологических поражений: монография)

Полученные Госом данные по инфицированию животных показали полную невозможность заражения таким способом человека в природных условиях. Подтверждением этого стал вспышка чумы в Маньчжурии спустя три года после публикации доклада Госа. После вскрытия 70 трупов выяснилось, что легочная форма чумы развивается не из альвеол, а из миндалин, слизистой трахеи и бронхов. При этом в легкие чума проникала не напрямую, а через кровоток. В итоге выводы Госа оказались на тот момент неверными, так как они не смогли объяснить механизм распространения чумы во время вспышки в Маньчжурии, и о достижениях ученого из форта «Александр I» забыли. Контагиозная модели заражения, базирующаяся на принципе «прикоснулся — заболел» главенствовала в те времена, и прогрессивные идеи русского ученого оказались не у дел.

Однако к идеям Госа об использовании мелкодисперсного аэрозоля возбудителя болезней вернутся гораздо позже – в конце 40-х годов XX века. И это будет работа совсем не из разряда гуманистических. Научные наработки российского форта «Александра I» лягут в основу ингаляционного инфицирования человека в рамках разработки биологического оружия.

По материалам:
Супотницкий М. В. Биологическая война. Ведение в эпидемиологию искусственных эпидемических процессов и биологических поражений: монография. 2013.
Соколов Н. Химическая война. Минск. 1924.
Супотницкий М. В., Супотницкая Н.С. Очерки истории чумы. 2006.
Николаев Н. И. Чума. 1968.
supotnitskiy.ru
masterok.livejournal.com
samoupravlenie.ru

Автор:

Использованы фотографии:

supotnitskiy.ru, masterok.livejournal.com, samoupravlenie.ru

32 комментария

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной фармакологии, вирусологии и неврологии, и предназначено для лечения опасных нейровирусных инфекций в эксперименте. Для лечения опасных нейровирусных инфекций мышам вводят препарат Моликсан^® в одноразовой дозе 20,0 мг/кг массы тела сразу после заражения и через 24, 48, 72 часа. Использование изобретения позволяет повысить эффективность борьбы с заболеваниями, вызываемыми возбудителями опасных нейровирусных инфекций. 6 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, вирусологии и неврологии, и направлено на раннее этиотропное лечение вирусных инфекций центральной нервной системы и может быть использовано для лечения опасных нейровирусных инфекций.

Инфекционные заболевания продолжают оставаться одной из заметных проблем современной медицины. Особое значение имеют опасные инфекционные заболевания, а среди последних — вирусные инфекции с преимущественным поражением центральной нервной системы, к числу которых отнесены геморрагические лихорадки, энцефалиты и энцефаломиелиты и др. [Руководство по военной микробиологии / Под общ. ред. П.И. Мельниченко [и др.]. — М.: Военное издательство, 2005. — 511 с.; Руководство по организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профилактических) и лечебно-эвакуационных мероприятий в войсках (силах) в условиях применения противником биологического оружия. — М.: Военное издательство, 2003. — 176 с.].

Вспышки этих инфекций регистрируют, прежде всего, в развивающихся странах с нестабильной социально-экономической обстановкой [Спирин А.С. Современная биология и биологическая безопасность / А.С. Спирин // Человек. — 1998. — №5. — С. 5-11; CBR Threats: A case study / K.Cuneo [et al.] // Crisis Res.J. -2005. — Vol. 1, №3. — P.50-52; VienPoint: Terrorism and dispelling the myth of a panic prone public / B. Sheppard [et al.] // J.Public Health Policy. — 2006. — Vol. 27, №3. — P. 219-245.]. Для развитых стран, включая Россию, упомянутые инфекции также не потеряли на сегодняшний день своей актуальности, о чем свидетельствуют:

— периодическая активизация на их территории природных очагов инфекций (геморрагическая лихорадка с почечным синдромом, Конго-крымская геморрагическая лихорадка, клещевой энцефалит и др.);

— периодические вспышки лихорадки Западного Нила, птичьего гриппа, Калифорнийского энцефалита, Японского энцефалита, лихорадки Сахалин, лихорадки Иссык-Куль и др. [Биотерроризм: национальная и глобальная угроза / Г.Г. Онищенко и др. // Вестн. Рос. Акад. Наук. — 2003. — Т. 73, №3. — С. 194-204].

Анализ современного состояния санитарно-эпидемиологической обстановки показывает, что в некоторых сопредельных с территорией Российской Федерацией странах сохраняется эпидемически неблагополучная ситуация по целому ряду инфекционных заболеваний. При этом наибольшую угрозу представляют особо опасные вирусные инфекции (далее — ООВИ), к числу которых следует отнести лихорадку долины Рифт (ЛДР), Венесуэльский энцефаломиелит лошадей (ВЭЛ), клещевой энцефалит (КЭ)

В настоящее время сохраняется высокая вероятность применения опасных инфекций центральной нервной системы вирусной природы в качестве потенциальных агентов биотерроризма, в том числе и против России. По мнению отечественных и зарубежных специалистов приоритет среди этих агентов будет отдаваться нетрадиционным в генетическом отношении возбудителям, против которых известные средства профилактики и лечения могут оказаться не эффективными [Биотерроризм: национальная и глобальная угроза / Г.Г. Онищенко и др. // Вестн. Рос. Акад. Наук. — 2003. — Т. 73, №3. — С. 194-204].

Известен способ противовирусной терапии с использованием иммуномодулирующих лекарственных средств на основе индукторов интерферона (патент США 4314061, МКИ C07D 413/14). Данное средство также обладает определенным профилактическим и лечебным эффектом, и его используют растворенным в воде, на мазевой основе или в других фармацевтически приемлемых носителях.

Известен способ лечения клещевого энцефалита, включающий введение в организм препарата альфа 2b интерферона человека, когда в качестве препарата альфа 2b интерферона человека используют «Реаферон-ЕС-Липинт», полученный включением рекомбинантного альфа-2b интерферона в липосомы, который вводят в организм перорально два раза в сутки за 30 мин до еды в дозе 500000 ME: (Патент на изобретение (RU №2473364 МПК А61Р 31/12, A61K 38/21)

Известен способ лечения клещевого энцефалита с использованием комплексной терапии, включающей противовирусные, дезинтоксикационные и дегидратирующие средства и дополнительно назначают введение даларгина ( Патент на изобретение RU №2167671, МПК А61Р 31/12, A61K 38/21).

Известен способ лечения клещевого энцефалита и болезни Паймера с использованием циклоферона (Стандарты оказания медицинской помощи больным клещевым энцефалитом и болезнью Паймера. Приказ Министерства Здравоохранения и Социального развития РФ №85 от 15.03.2007 года).

Целью изобретения является повышение эффективности борьбы с заболеваниями, вызываемыми возбудителями опасных нейровирусных инфекций, а также расширение арсенала средств для лечения опасных нейровирусных инфекций.

Цель достигается тем, что для лечения опасных нейровирусных инфекций назначают синтетический низкомолекулярный пептидный иммуномодулятор, причем в качестве препарата используют Моликсан^® в одноразовой дозе 20,0 мг/кг массы тела сразу после заражения далее — через 24, 48, 72 часа после заражения.

В таблице 1 представлена оценка эффективности моликсана^® (субстанция) и моликсана^® (лекарственная форма) в качестве средства этиотропного лечения экспериментальной инфекции вируса венесуэльского энцефалита лошадей (ВЭЛ).

В таблице 2 представлена сравнительная оценка эффективности моликсана^® и циклоферона в качестве средств этиотропного лечения экспериментального клещевого энцефалита

В таблице 3 показана эффективность лекарственной формы препарата моликсан^® в качестве средства этиотропного лечения экспериментальной герпесвирусной инфекции, вызванной вирусом герпеса простого (ВГП) 1 типа.

В таблице 4 осуществлена сравнительная оценка эффективности препаратов моликсан^® и циклоферон, использованных в качестве средства этиотропного лечения экспериментальной герпесвирусной инфекции, вызванной ВГП 2 типа.

В таблице 5 проведена сравнительная оценка противовирусной эффективности фармакологического препарата моликсан^® и циклоферона в качестве средств этиотропного лечения экспериментальной инфекции ЛДР.

В таблице 6 представлена сравнительная оценка противовирусной эффективности фармакологического препарата моликсан^® и циклоферона в качестве средств этиотропного лечения экспериментальной инфекции, вызванной вирусом лихорадки Западного Нила (ЛЗН).

Способ реализуется следующим образом: для лечения опасных нейровирусных инфекций назначают синтетический низкомолекулярный пептидный иммуномодулятор, причем в качестве препарата используют моликсан^® в одноразовой дозе 20,0 мг/кг массы тела сразу после заражения и далее — через 24, 48 и 72 часа после заражения.

Моликсан^® представляет собой органическую соль, включающую инозин (пуриновая компонента) и глицил-цистеинил-глутамат динатрия (пептидная компонента) в соотношении 1:1. Моликсан^® регулирует тиол-дисульфидный обмен гепатоцитов, индуцирует экспрессию ферментов первой и второй фаз детоксикации ксенобиотиков, подавляет репликацию ДНК и РНК вирусов, вызывающих гепатиты В и С, стимулирует продукцию интерферонов макрофагами печени, интерлейкина-2 Т-лимфоцитами. Цитопротекторная и иммуномодулирующая активности пептидной и пуриновой компонент препарата моликсан^® приводят к ингибированию цитолиза гепатоцитов, разрешению воспалительного процесса при токсических и вирусных поражениях клеток печени. Пептидная и пуриновая компоненты препарата моликсан^® опосредованно влияют на метаболизм, процессы пролиферации, дифференцировки и апоптоза клеток печени, способствуя восстановлению нормальной структуры печеночной ткани. Препарат обладает иммуномодулирующим, противовирусным и гепатопротекторным действием [Справочник «Видаль». Лекарственные препараты в России: Справочник. М: АстраФармСервис. — 2012. — Б-770 с.] Препарат может быть использован для профилактики и лечения химиолучевых стоматитов при химиолучевой терапии рака орофарингеальной области. (Патент на изобретение RU №2519164, МПК А61К 38/04)

Приводим конкретный пример реализации способа.

Животным, подвергнутым воздействию вирусов, вызывающих развитие особо опасной нейроинфекции, — сразу после заражения или одновременно с заражением, через 24 ч, 48 ч и 72 ч после заражения (схема — раннего этиотропного лечения) вводится синтетический низкомолекулярный гексапептид — фармакопейный препарат моликсан^®. Применение изучаемого фармсредства способствовало 80-100% выживаемости экспериментальных животных при заражающей дозе вирусов равной, соответственно, 2 ЛД₅₀-20 ЛД₅₀. Такого рода данные свидетельствуют о достаточно высокой противовирусной активности фармакологического средства моликсан^®.

В доступных иточниках информации сведений о возможности применение препарата моликсан^® в качестве средства раннего этиотропного лечения нейровирусных инфекционных заболеваний нами не обнаружено.

Новая функция моликсан^® а не вытекает с очевидностью из его известных свойств и состава. Активность препарата моликсан^® в опытах in vivo против нескольких вирусов, вызывающих гепатиты В и С, не означает то, что препарат непременно будет обладать и активностью против вирусов обозначенных нейровирусных инфекций. Отсутствие подобной зависимости подтверждается литературными данными [Справочник Видаль, 2015].

Для доказательства соответствия заявляемого способа критерию изобретения «промышленная применимость» была проведена серия исследований.

В качестве средства этиотропного лечения (ЭЛ) инфекционных заболеваний вирусной этиологии апробированы:

— Моликсан^® — лекарственная форма (раствор для внутривенного и внутримышечного введения) (Санкт-Петербург) (сер. 01012011, срок годн. до 02.2013 г.);

— циклоферон — фармакопейный препарат в инъекционной форме производства ООО «НТФФ Полисан» (Санкт-Петербург).

Исследуемый препарат вводили подкожно в объеме 0,5 мл в разовой дозе 20 мг/кг массы тела мышей по схеме:

— сразу после заражения и далее — через 24 ч, 48 ч и 72 ч после заражения.

Препарат сравнения — циклоферон вводили мышам подкожно в объеме 0,5 мл в разовой дозе 100мг/кг по такой же схеме.

Для моделирования опасных инфекционных заболеваний (ОИЗ) использованы вирулентные и вакцинные штаммы возбудителей: венесуэльского энцефаломиелита лошадей; клещевого энцефалита; герпеса простого 1 и 2 типа; лихорадки долины Рифт; лихорадки Западного Нила.

Исследования по оценке эффективности препарата моликсан^® выполнены на белых неинбредных мышах-самцах массой 18-20 г.

В исследования брали животных, в обязательном порядке выдержавших карантин в течение 2 недель в клинике экспериментальных биологических моделей НИИЦ (МБЗ) ФГУ «ГосНИИИ ВМ Минобороны России».

Показатель токсичности (ЛД₅₀) исследуемых соединений определяли по методу Кербера в модификации И.П. Ашмарина и А.А. Воробьева [И.П. Ашмарин, А.А. Воробьев Статистические методы в микробиологических методах. — Л. Гос. Изд-во мед. Лит. — 1962. — 178 с.]

Эффективность изучаемых препаратов определяли по сопоставлению величин показателей выживаемости животных в подопытных (получавших соответствующие препараты) и контрольных группах. Процент выживших животных в подопытных и контрольных группах определяли по таблицам Генеса B.C. [Генес B.C. Некоторые простые методы кибернетической обработки данных диагностических и физиологических исследований.- М.: Наука. — 1967. — 208 с.]. При этом наблюдение за инфицированными животными проводили в течение 14-21 сут, ежедневно регистрируя число живых и павших в подопытных и контрольных группах, а также среднюю продолжительность жизни (СПЖ, суток) подопытных и контрольных животных. Среднюю продолжительность жизни Т суток инфицированных животных вычисляли по формуле:

Где N — количество выживших животных, гол;

S — срок наблюдения, сут;

N1 — количество зараженных мышей в группе, гол

Статистический анализ результатов исследования произведен с помощью компьютерной программы статистической обработки данных Statistica 6.0 for Windows. Для оценки количественных показателей определяют стандартные количественные характеристики: среднее значение показателя (М), среднеквадратичное отклонение, стандартная ошибка средней величины (m). Сравнение количественных данных проводят при помощи парного и непарного теста Стьюдента с использованием t-критерия Стьюдента. Результаты представлены как М±m. Различия считают достоверными при р≤0,05.

Нами была оценена эффективность препарата моликсан^®(субстанция) и моликсан^® (лекарственная форма) при лечении экспериментальной инфекции, вызванной вирусом венесуэльского энцефалита лошадей (ВЭЛ). Вирус венесуэльского энцефалита лошадей — патогенный штамм Тринидад. Накопление вируссодержащего материала для последующего заражения лабораторных животных осуществляли с использованием 9-11 дневных развивающихся куриных эмбрионов — 30-50 шт. Первоначально готовили пять последовательных десятикратных разведений вируссодержащей суспензии. По 0,2 мл каждого разведения вируссодержащей суспензии вносили в аллантоисную полость развивающихся куриных эмбрионов. Место инъекции вируссодержащей суспензии покрывали расплавленным парафином. Затем развивающиеся куриные эмбрионы помещали в термостат при температуре (37±0,5)°С на 18 ч, периодически оценивая их жизнеспособность с помощью овоскопа. По истечении времени инкубации в термостате оценивали жизнеспособность развивающихся куриных эмбрионов и из «тушек» живых эмбрионов готовили 10% суспензию вируссодержащего материала с использованием физиологического раствора с добавлением антибиотиков (пенициллин из расчета 100 ЕД на 1 мл, стрептомицин — 200 ЕД на 1 мл). Полученную суспензию центрифугировали в течение 10 мин при 1,5-2,0 тыс. об./мин и температуре плюс (3±0,5)°С. Надосадочную жидкость разливали во флаконы объемом 1,0 мл и использовали для дальнейшего заражения экспериментальных животных мышей. Исходный титр вируса 10⁷-10⁸ ЛД₅₀/мл

Моделирование смертельной инфекции ВЭЛ проводили на белых беспородных мышах массой 18-20 г путем их подкожного заражения вируссодержащим материалом в объеме 0,3 мл. Использовали две заражающие дозы возбудителя, вызывавшие в контроле гибель 57-100% инфицированных животных. После заражения за мышами устанавливали ежедневное наблюдение в течение 21 суток с регистрацией количества живых и павших особей, Инкубационный период моделируемой инфекции составляет в среднем 5 суток.

Заболевание характеризуется следующими признаками: мыши становятся малоподвижными, отказываются от еды и питья, шерсть у них взъерошена. В последующем развиваются и нарастают явления энцефалита (нарушение координации, появление парезов и параличей), и наступает гибель инфицированных животных. Максимальная гибель мышей отмечается, как правило, на 7-9 день после заражения.

Заражение экспериментальных животных осуществляли вирусом ВЭЛ в дозах 2 или 20 ЛД₅₀. Численность животных в подопытных и контрольных группах — по 10 особей. Полученные результаты представлены в таблице 1.

«Оценка эффективности моликсана^® (субстанция) и моликсана^® (лекарственная форма) в качестве средств этиотропного лечения экспериментальной инфекции ВЭЛ»

Представленные в таблице 1 данные свидетельствуют, что наибольшим защитным эффектом обладает препарат моликсан^® — уровень защиты 80 и 60% при заражении возбудителем в дозе 20 ЛД₅₀. Этот препарат обеспечивает достаточно высокий уровень защиты при заражении наиболее высокими дозами вируса ВЭЛ. Препарат циклоферон — проявляет менее выраженную активность в отношении экспериментального ВЭЛ.

Кроме того полученные данные свидетельствуют о том, что субстанция и лекарственная форма препарата моликсан^® по формируемому при их введении в организм животных лечебному эффекту в отношении экспериментальной инфекции ВЭЛ идентичны. Так, в случае применения по схеме 2 (сразу после заражения и далее через 24 ч, 48 ч и 72 ч после заражения) при исследований можно заключить, что по лечебная активность в отношении экспериментальной инфекции ВЭЛ моликсан^® превышает эффект препарата сравнения циклоферона.

Нами была оценена эффективность препарата моликсан^® в качестве средства раннего этиотропного лечения при экспериментальном клещевом энцефалите — вирус клещевого энцефалита (КЭ), — патогенный штамм Абсетаров. Накопление вируссодержащего материала для заражения лабораторных животных проводили на мышах-сосунках. Первоначально готовили пять последовательных десятикратных разведений вируссодержащего материала, которым служил центрифугат 10% суспензии мозга зараженных ранее мышей или регидратированный из лиофильного состояния вируссодержащий материал. По 0,02 мл каждого разведения вводили в мозг мышам-сосункам, за которыми устанавливали наблюдение в течение 24-48 ч, по окончании которого животных подвергали эвтаназии, извлекали головной мозг и депонировали его по три образца в пенициллиновые флаконы, которые хранили в морозильной камере при температуре минус (20±0,5)°С. В дальнейшем, 10% суспензию головного мозга использовали в качестве вируссодержащего материала. Исходный титр вируса 10²-10³ ЛД₅₀/мл;

Моделирование смертельной инфекции КЭ проводили на белых беспородных мышах массой 18-20 г путем подкожного заражения их вируссодержащим материалом в объеме 0,3 мл. Использовали две заражающие дозы возбудителя, вызывающие в контроле гибель около 100% инфицированных животных (в зависимости от использованной заражающей дозы вируса)

После заражения за мышами устанавливают ежедневное наблюдение в течение 21 суток с регистрацией количества живых и павших особей. Инкубационный период моделируемой инфекции составляет в среднем 5 суток.

Заболевание характеризуется следующими признаками: мыши становятся малоподвижными, отказываются от еды и питья, шерсть у них взъерошена. В последующем развиваются и нарастают явления энцефалита (нарушение координации, появление парезов и параличей), и наступает гибель инфицированных животных. Максимальная гибель мышей отмечается, как правило, на 7-9 день после заражения.

Результаты исследований приведены в таблице 2. «Сравнительная оценка эффективности моликсана^® и циклоферона в качестве средств раннего этиотропного лечения экспериментального клещевого энцефалита»

Как следует из представленных данных, исследуемые препараты (моликсан и циклоферон) при применении у животных, инфицированных возбудителем в дозе 2 ЛД₅₀, проявляли практически одинаковую защитную эффективность, обеспечивая 100% выживаемость инфицированных мышей на фоне их 100% летальности в контроле. В то же время, если препараты применяли у животных, инфицированных возбудителем в дозе 20 ЛД₅₀, то в этих условиях моликсан^® оказался более эффективным, чем препарат сравнения — циклоферон. Так, если от применения последнего (циклоферона) вне зависимости от схемы введения выживаемость животных составила 50% на фоне 100% летальности в контроле, то при применении моликсана^® аналогичный показатель возрастал до 100%.

Была осуществлена оценка эффективности лекарственной формы препарата моликсан^® в качестве средства раннего этиотропного лечения экспериментальной герпесвирусной инфекции, вызванной ВГП 1 типа

Для моделирования герпетической инфекции — использовали вирус герпеса простого (ВГП) 1 типа, штамм УС, исходный титр вируса 10²-10³ ЛД₅₀/мл или ВГП 2 типа, штамм ВН, исходный титр вируса 10²-10³ ЛД₅₀/мл.

Для внутримозгового накопления модельного вируса, а также определения инфекционной активности вируссодержащего материала использовали мышей-сосунков. Накопление ВГП-1 проводили посредством интрацеребрального заражения мышей-сосунков. Инфекционную активность вируссодержащих материалов определяли по методу Рида-Менча титрованием на мышах-сосунках. Величину LD₅₀ применительно к каждому возбудителю определяли на белых беспородных мышах с расчетом этого критерия по методу Кербера в модификации И.П. Ашмарина и А.А.Воробьева.

Моделирование герпетической инфекции осуществляли путем внутрибрюшинного введения белым беспородным мышам суспензии вируса герпеса простого 1 и 2 типа (ВГП 1 типа или ВГП 2 типа) в объеме 0,5 мл. За 2 ч перед заражением животным в целях понижения естественной резистентности внутримышечно вводили 0,2 мл гидрокортизона. Численность опытных и контрольных групп составляла по 10 мышей в каждой.

Заболевание характеризуется следующими признаками: мыши становятся малоподвижными, отказываются от еды и питья, шерсть у них взъерошена. В последующем развиваются и нарастают явления энцефалита (нарушение координации, появление парезов и параличей), и наступает гибель инфицированных животных. Максимальная гибель мышей отмечается, как правило, на 5-7 день после заражения.

Представленные в таблице 3 данные об эффективности лекарственной формы препарата моликсан^®, использованной в качестве средства раннего этиотропного лечения экспериментальной герпесвирусной инфекции, вызванной ВГП 1 типа). Они свидетельствуют о том, что лекарственная форма препарата моликсан^®, тестируемая по вышеописанной схеме, проявила выраженное защитное действие в отношении экспериментальной герпесвирусной инфекции. Установлено, что при введении препарата по схеме 2 (раннего этиотропного лечения), в зависимости от заражающей дозы вируса (2 или 20 ЛД₅₀) выживаемость инфицированных ВГП-1 животных составила 100% и 80%, соответственно. В ранее проведенных исследованиях с субстанцией препарата моликсан^® были получены в отношении герпесвирусной инфекции аналогичные результаты.

Полученные результаты свидетельствуют, что оцениваемый препарат задерживает гибель инфицированных мышей, обеспечивает ее более плавную динамику в отличие от той, которая регистрировалась среди инфицированных мышей в контрольной группе. В последних случаях наблюдали резкий скачок в сторону снижения количества выживших животных, что приходилось на 6-7 сут после заражения.

Была осуществлена оценка эффективности лекарственной формы препарата моликсан^® в качестве средства раннего этиотропного лечения экспериментальной герпесвирусной инфекции, вызванной ВГП 2 типа

Результаты исследований на экспериментальной модели герпетической инфекции, вызванной ВГП 2 типа.

Представленные в таблице 4 данные свидетельствуют о том, что как и на модели герпетической инфекции, вызванной ВГП 1 типа, в данных условиях оцениваемые препараты оказывают защитное действие в отношении экспериментальной герпесвирусной инфекции, вызванной ВГП 2 типа. При этом моликсан^® оказался более эффективным, чем циклоферон. Так, если же препарат применяли по схеме раннего этиотропного лечения, то в этих условиях защитный эффект в зависимости от заражающей дозы вируса составил 50-80% на фоне 100% летальности в контроле. Использование циклоферона в аналогичных условиях практически показало, что его защитный эффект на 20-30% был ниже, чем от применения моликсан^®.

Была проведена оценка эффективности препарата моликсан^® при лечении экспериментальной вирусной инфекции, вызванной вирусом лихорадки долины Рифт (ЛДР).

Вирус лихорадки долины Рифт (ЛДР)-вирулентный штамм 8-87. Накопление вируссодержащго материала для заражения лабораторных животных осуществляли с использованием 3-5-дневных мышей сосунков в количестве 10-15 голов. Первоначально пять последовательных десятикратных разведений вирусодержащего материала. Вируссодержащий материал (по 0,02 мл каждого разведения) вводили в мозг мышам-сосункам, за которыми устанавливали наблюдение в течение 24-48 ч. Животных забивали эфиром, извлекали головной мозг и депонировали его по три образца в пенициллиновые флаконы, которые хранили в морозильной камере при температуре минус (20±0,5)°С. В дальнейшем 10% суспензию головного моза использовали в качестве вируссодержащего материала. Исходный титр вируса 10⁵-10⁶ ЛД₅₀/мл

Моделирование смертельной инфекции ЛДР проводили на белых беспородных мышах массой 18-20 г путем их подкожного заражения вируссодержащим материалом в объеме 0,5 мл. Использовали две заражающие дозы возбудителя, вызывающие в контроле гибель около 100% инфицированных животных. После заражения за мышами устанавливали ежедневное наблюдение в течение 14 суток с регистрацией количества живых и павших особей. Инкубационный период моделируемой инфекции составил в среднем 3 суток.

Заболевание характеризуется следующими признаками: у мышей развивается адинамия, они отказывались от еды и питья, шерсть у них взъерошена. В последующем развивались и нарастали парезы, параличи, и наступала гибель инфицированных животных. Максимальная гибель мышей отмечалась, как правило, на 7-9 день после инфицирования

Препарат моликсан^® применяли подкожно, в дозе 20 мг/кг массы тела мышей по схеме раннего этиотропного лечения после заражения вирусом ЛДР в диапазоне доз от 2 до 20 ЛД₅₀. Численность животных в группе — по 10 особей. Полученные результаты представлены в таблице 5. Представленные в таблице 5 данные свидетельствуют, что наибольшим защитным эффектом обладает препарат моликсан^® — защита на уровне 100% при заражении животных вирусом ЛДР в дозе 2,0-20 ЛД₅₀. Моликсан^® увеличивает СПЖ инфицированных животных на 3-4 суток по сравнению с аналогичным показателем в контроле заражения.

Кроме того полученные данные свидетельствуют о том, что наилучший протективный эффект в отношении ЛДР был получен при применении моликсана^®. Вне зависимости от схемы применения препарат обеспечивал 100% защиту инфицированных мышей на фоне 100% летальности в контроле. Фармакологический препарат циклоферон (прототип) в данных условиях был, практически, в 1,5 раза менее эффективен, чем исследуемое средство.

Нами была оценена эффективность препарата моликсан^® при лечении экспериментальной вирусной инфекции, вызванной вирусом лихорадки Западного Нила (ЛЗН).

Вирус лихорадки Западного Нила (ЛЗН) — патогенный штамм Нр-91. Накопление вируссодержащго материала для заражения лабораторных животных осуществляют с использованием 3-5-дневных мышей-сосунков в количестве 10-15 голов. Первоначально готовят пять последовательных десятикратных разведений вируссодержащего материала, которым служит центрифугат 10% суспензии мозга зараженных ранее мышей или регидратированный из лиофильного вируссодержащий материал. Вируссодержащий материал (по 0,02 мл каждого разведения) вводят в мозг мышам-сосункам, за которыми устанавливают наблюдение в течение 96-120 ч. Животных забивают эфиром, извлекают головной мозг и депонируют его по три образца в пенициллиновые флаконы, которые хранят в морозильной камере при температуре минус (50±0,5)°С. В дальнейшем 10% суспензию головного мозга используют в качестве вируссодержащего материала. Исходный титр вируса 10³-10⁴ ЛД₅₀/мл.

Моделирование смертельной инфекции ЛЗН проводили на белых беспородных мышах массой 18-20 г путем их подкожного заражения вируссодержащим материалом в объеме 0,5 мл. Использовали две заражающие дозы возбудителя, вызывающие в контроле гибель 80-100% инфицированных животных. После заражения за инфицированными животными устанавливали ежедневное наблюдение в течение 14 суток с регистрацией количества живых и павших особей. Инкубационный период моделируемой инфекции составлял в среднем 3 суток.

Заболевание характеризуется следующими признаками: у мышей развивалась адинамия, они отказывались от еды и питья, шерсть у них взъерошена. В последующем развивались и нарастали парезы, параличи, и наступала гибель инфицированных животных. Максимальная гибель мышей отмечалась, как правило, на 6-9 день после инфицирования

Препарат моликсан^® вводили подкожно, в дозе 20 мг/кг массы тела по схеме раннего этиотропного лечения после заражения вирусом ЛЗН в диапазоне доз от 2 до 20 ЛД₅₀. Численность животных в группе — по 10 особей. Полученные результаты представлены в таблице 6.

Представленные в таблице 6 данные свидетельствуют, что наибольшим защитным эффектом обладает препарат моликсан^® — защита на уровне 100% при заражении животных вирусом ЛЗН в дозе 2,0-20 ЛД₅₀. Моликсан^® увеличивает СПЖ инфицированных животных на 2-3 суток по сравнению с аналогичным показателем в контроле заражения.

Анализ данных таблицы 6 показал, что наилучший протективный эффект в отношении ЛЗН был получен при применении моликсана^® Вне зависимости от схемы применения препарат обеспечивал 100% защиту инфицированных мышей на фоне 100% летальности в контроле. Фармакологический препарат циклоферон в данных условиях был практически в 1,5 раза менее эффективен, чем заявляемое средство.

Совокупность результатов проведенных исследований позволяет сделать заключение о том, что моликсан^® следует рассматривать в качестве перспективного средства раннего этиотропного лечения вирусных заболеваний, в том числе вызываемых ООВИ. При этом у моликсана^® выявлен универсализм действия. Он проявляет высокую эффективность при использовании в качестве средства раннего этиотропного лечения опасных нейровирусных инфекий.

Следует отметить практически одинаковый лечебный (протективный) эффект от применения препарата при его использовании на моделях различных по механизму развития ООВИ (энцефаломиелит, геморрагическая лихорадка, энцефалит, герпетическая инфекция). Надо полагать, что реализация действия препарата опосредуется его иммунотропными свойствами, а именно с его реставрационными способностями в отношении иммунокомпрометирующих состояний в процессе развития этих инфекций. Как известно, патогенез ООВИ сопряжен с иммунными дисфункциями, которые развиваются под влиянием либо самих возбудителей, либо, что наиболее часто, вследствие воздействия на структурные компоненты иммунной системы продуктов их жизнедеятельности. При этом имеет место дисбаланс в функционировании как иммунокомпетентных клеток и клеток системы неспецифической иммунологической резистентности, так и нарушение их секреторной активности, приводящее в конечном итоге к дисбалансу медиаторной составляющей иммунной системы. Вышеописанным изменениям многие исследователи придают ключевую роль в развитии и прогрессировании ООВИ, итогом которых является формирование общей иммунодепрессии. Поэтому нельзя в полной мере исключить действие препарата в отношении развития феномена иммунодепрессии. Кроме того, возможно также и то, что проникая через гематоэнцефалический барьер препарат способен непосредственно оказывать защитное действие на клетки-мишени ЦНС, подвергающиеся воздействию возбудителя. Однако данное обстоятельство справедливо применительно к энцефалитам и энцефаломиелитам, развитие которых в наибольшей степени сопряжено с поражением клеточных структур головного мозга.

СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ОПАСНЫХ НЕЙРОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ

Способ лечения опасных нейровирусных инфекций в эксперименте путем назначения фармакологического препарата мышам, отличающийся тем, что в качестве препарата для лечения используют Моликсан^® в одноразовой дозе 20,0 мг/кг массы тела сразу после заражения и через 24, 48, 72 часа.